N-磺酰氨甲酰膝溝藻毒素2&3標準品（CRM-C1&2）的制備

N-磺酰氨甲酰膝溝藻毒素2&3（C1&2）是從大規(guī)模實驗室培養(yǎng)的亞歷山大藻中分離出來的，然后通過幾個色譜步驟進行純化[4]。通過LC-MS/MS[5，6]（圖1和圖2）和1H NMR證實了C182的結(jié)構(gòu)和純度。使用LC高分辨率MS（LC-HRMS）對C1和C2的[M+H]*離子獲得了476.04998（CtoHsN>O1S2*時4=0.2ppm）的測量準確度。通過LC ox FLD[7]（圖3）、Uv毛細管電泳（CE-Uv）[8]和化學(xué)發(fā)光氮檢測（LC-CLND）的LC進一步評估純度。

儲備溶液是通過在稀釋乙酸（20μM，pH 5）中稀釋純化的C1&2來制備的，用于使用1H-NMR（qNMR）[10]進行定量。CRM-C182-c溶液是通過將儲備溶液在脫氣的稀釋乙酸（20%μM，pH5）中精確稀釋來制備。將等分試樣分配到干凈的充氬琥珀色玻璃安瓿中，并立即進行火焰密封。每個安瓿含有大約0.5毫升溶液。

N-磺酰氨甲酰膝溝藻毒素2&3標準品（CRM-C1&2）的分析方法與價值分配

CRM-C1&2-c的認證值（表1）基于在NRC使用三種分析方法獲得的結(jié)果：使用鄰苯二甲酸氫鉀（NIST SRM 84L）進行校準的qNMR，使用咖啡因（NMIAM724d）進行校正的LC CLND，以及使用CRM-C182-b作為校準劑的LC pcox FLD。

低水平的脫氨酰gonyautoxin-2（dcGTX2）和十甲酰gonyaautoxin-3（dcGTX3）通過LC-ox-FLD分配信息值，并使用NRC CRM對這些類似物進行校準（表2）。

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